通過引入手性環境使對映異構體間呈現物理特征的差異，從而達到光學異構體拆分的目的。要實現手性識別，手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用。這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結果。這些相互作用通過影響包埋復合物的形成，特殊位點與分析物的鍵合等而改變手性分離結果。由于這種作用力較微弱，因此需要仔細調節、優化流動相和溫度以達到分離效果。

　　大賽璐手性柱為弱陰離子交換手性柱，可用于酸性化合物的手性分離，特別適合拆分含有羧酸、磷酸基或膦酸基、磺酸基的酸性化合物。這兩支色譜柱的固定相中分別含有奎寧（QN）和奎寧定（QD）衍生物，奎寧和奎寧定是一對對映異構體，這兩支柱子上的洗脫順序相反。這兩支柱子常用反相洗脫模式，也可使用純的極性有機溶劑作流動相。

　　大賽璐手性柱主要用于分離自由氨基酸的兩性離子手性固定相，對兩性手性化合物，尤其是未經衍生的氨基酸和多肽，有顯著的立體選擇性，特別適合拆分含有羧酸、磷酸基或膦酸基、磺酸基的酸性化合物。手性填料是一對對映異構體，所以對映體在兩支柱子上的出峰順序是相反的。這兩支柱子可使用所有常規的HPLC流動相（如甲醇、乙腈、水等）。